摘  要:本發(fā)明描述了一種用于借助于提取，隨后以下兩種可選擇的工作工藝從工業(yè)大麻生產(chǎn)(-)-大麻二酚(CBD)的工藝：工藝A，所述工藝A提供用溶劑首先提取至堿性pH并且然后提取至酸性pH，以分離羧基形式的CBD，該羧基形式的CBD然后經(jīng)歷脫羧；以及工藝B，所述工藝B提供蠟和瀝青的消除以及然后通過色譜法的純化。在兩種可選擇的工作工藝結(jié)束時，CBD以高純度結(jié)晶形式結(jié)晶而獲得。

 

技術(shù)要點

1.一種用于生產(chǎn)大麻二酚(CBD)或另一種中性大麻素的工藝，所述工藝包括：

i)在0℃和溶劑的回流溫度之間的溫度使含有CBD和/或CBDA或所述另一種中性大麻素的生物質(zhì)或者呈羧酸的形式的生物質(zhì)與提取溶劑接觸持續(xù)至少10分鐘，以在生物質(zhì)去除之后獲得提取溶液；所述提取溶劑選自由以下組成的組：戊烷、己烷、庚烷、辛烷、甲基環(huán)己烷、丙酮、丙醇、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、甲苯、二氯甲烷及其混合物；

根據(jù)工藝(A)繼續(xù)，所述工藝(A)包括：

ii-a)使所述提取溶液與水-醇溶液接觸，并且用合適的堿性溶液將pH調(diào)節(jié)至7.5-12.5，以在相分離之后，獲得第一水-醇相和第一有機相；如果所述提取溶劑是水混溶的溶劑，則還添加選自由以下組成的組的第一水不混溶的溶劑：戊烷、己烷、庚烷、甲基環(huán)己烷及其混合物；

iii-a)使所述第一水-醇相與第二水不混溶的溶劑和適合于使pH達(dá)到2.0-6.5的酸溶液接觸，以獲得第二有機相和第二水-醇相；所述第二水不混溶的溶劑選自由以下組成的組：戊烷、己烷、庚烷、甲基環(huán)己烷及其混合物；

iv-a)將所述第二有機相濃縮，并且使所得到的油在65℃和180℃之間的溫度經(jīng)歷加熱持續(xù)至少10分鐘的時間段，以獲得CBDA到CBD的脫羧；

或者根據(jù)第二工藝(B)繼續(xù)，所述第二工藝(B)包括：

ii-b)將所述提取溶液濃縮直到獲得提取油，并且在小于20℃的溫度使所述提取油與醇接觸持續(xù)至少10分鐘，以獲得提取物和蠟的懸浮液，所述醇選自由以下組成的組：甲醇、乙醇、丙醇及其混合物；

iii-b)將所述懸浮液過濾并濃縮以獲得無蠟提取油，并且使所述無蠟提取油與有機水不混溶的溶劑和水-醇溶液接觸，以獲得含有無蠟且無瀝青的提取物的有機相和水-醇、含有瀝青的相；

iv-b)將所述含有無蠟且無瀝青的提取物的有機相濃縮，并且使用合適的洗脫劑相經(jīng)歷硅膠色譜法，并且收集含有CBD或所述另一種中性大麻素的級分；以及用以下結(jié)束。

v)使CBD或所述另一種中性大麻素從選自由戊烷、己烷、庚烷、辛烷、甲基環(huán)己烷及其混合物組成的組的第三水不混溶的溶劑中結(jié)晶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其中所述生物質(zhì)選自由以下組成的組：大麻、Antal、Armanca、Beniko、Bialobrzeskie、Cannakomp、Carma、Carmagnola、Carmaleonte、Chamaeleon、Codimoro、CS、DaciaSacuieni、Delta-Ilosa、Delta-405、Denise、Diana、Dioica88、ElettaCampana、Epsilon68、Fedora17、Felina32、Férimon、Fibranova、Fibrol、Finola、Futura75、Ivory、KCBonusz、KCDora、KCVirtus、KCZuzuna、Kompolti、KompoltiHibridTC、Lipko、Lovrin110、Marcello、Markant、Monica、Rajan、Ratza、Santhica23、Santhica27、Santhica70、SecuieniJubileu、Silvana、Szarvasi、Tiborszallasi、Tisza、Tygra、UnikoB、Uso-31、Wielkopolkie、Wojko、Zenit。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的工藝，其中所述生物質(zhì)在經(jīng)歷溶劑提取之前被微粉化。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的工藝，其中進(jìn)行所述工藝A，進(jìn)行步驟(i)處的提取，同時保持大麻屬物種與選自由戊烷、己烷、庚烷、辛烷、甲基環(huán)己烷及其混合物組成的組的提取溶劑接觸；己烷優(yōu)選地用作所述提取溶劑，并且提取在0℃和35℃之間、優(yōu)選地在10℃和25℃之間的溫度進(jìn)行持續(xù)至少10分鐘的時間段。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的工藝，其中進(jìn)行所述工藝A，步驟(ii-a)的所述水-醇溶液使得所述醇選自由乙醇、甲醇組成的組，優(yōu)選地是甲醇，pH通過添加合適的堿性溶液來調(diào)節(jié)，優(yōu)選地在8.0和8.5之間。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的工藝，其中進(jìn)行所述工藝A，步驟(iii-a)的pH通過添加乙酸溶液來調(diào)節(jié)，優(yōu)選地在4.5和5.5之間。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的工藝，其中進(jìn)行所述工藝A，在步驟(ii-a)結(jié)束時獲得的所述第一有機相經(jīng)歷所述工藝B的步驟(ii-b)-(iv-b)，并且由此獲得的CBD然后經(jīng)歷結(jié)晶。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的工藝，其中進(jìn)行所述工藝B，進(jìn)行步驟(i)處的提取，同時保持大麻屬物種與提取溶劑在所述溶劑的回流溫度接觸持續(xù)至少10分鐘，所述提取溶劑選自由丙酮、丙醇、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、甲苯、正己烷或己烷-異構(gòu)體混合物組成的組。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-3和8中任一項所述的工藝，其中進(jìn)行所述工藝B，在步驟(ii-b)中，所使用的醇是甲醇，同時將溫度保持在4℃-10℃、還更優(yōu)選地保持在4℃，持續(xù)至少10分鐘的時間段。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-3和8-9中任一項所述的工藝，其中進(jìn)行所述工藝B，在步驟(iii-b)中，通過在攪拌下添加溶劑和水-醇溶液從所述無蠟提取油中除去瀝青，所述溶劑選自由甲苯、戊烷、己烷、庚烷、辛烷及其混合物組成的組，優(yōu)選地己烷；其中所述醇合適地選自由乙醇和甲醇組成的組，優(yōu)選地甲醇。

11.根據(jù)權(quán)利要求1-3和8-10中任一項所述的工藝，其中按照所述工藝B，在步驟(iv-b)中，所述洗脫劑相是己烷(正己烷或異構(gòu)體混合物)和乙酸乙酯混合物，優(yōu)選地以在20：1和5：1之間的比。

 

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及從植物基質(zhì)中提取大麻素的領(lǐng)域；特別地，本發(fā)明涉及從大麻類(hemptype)中提取(-)-大麻二酚(CBD)并且以高純度晶體的形式獲得。

 

技術(shù)背景

大麻素或大麻酚是天然來源的化學(xué)品并且在生物化學(xué)上被分類為萜酚類(terpenophenols)。它們是通過與大麻素受體相互作用的能力而統(tǒng)一的化合物。

對于術(shù)語大麻素，它通常被識別為存在于大麻(Cannabissativa)中的化學(xué)化合物家族。

迄今為止，已經(jīng)鑒定出約七十種此類化合物，在此類化合物中最重要的是：

四氫麻酚(THC,Δ9-THC)、大麻二酚(CBD)、四氫次大麻酚(tetrahydrocannabivarin) (THCV)、大麻酚(CBN)、大麻環(huán)萜酚(cannabichromene)(CBC)、大麻環(huán)酚(cannabicyclol) (CBL)、大麻艾爾松(cannabielsoin) (CBE)、大麻萜酚(cannabigerol)(CBG)、大麻二醇(cannabinodiol) (CBND)、二羥基大麻酚(cannabitriol)(CBT)、次大麻酚(cannabivarin) (CBV)、大麻二酚(cannabidivarin) (CBDV)、次大麻色酚(cannabichromevarin)(CBCV)、次大麻萜酚(cannabigerovarin)(CBGV)和大麻萜酚單乙醚(cannabigerolmonoethylether) (CBGM)。

最近，從大麻中提取的具有標(biāo)準(zhǔn)化大麻素含量(THC和CBD)的藥物Sativex已經(jīng)被投放到市場上。

大麻素在大麻植物(Cannabissativahempplant)中以其羧基衍生物大麻素羧酸的形式存在，所謂的“中性大麻素”通過脫羧，即CO2消除，從大麻素羧酸衍生。因此，例如，大麻二酚(CBD)通過大麻二酚酸(CBDA)脫羧來形成。

 

(-)-大麻二酚(CBD)可以在植物中以其酸性形式(CBDA)和以脫羧形式(CBD)兩者存在。生物質(zhì)內(nèi)大麻素的一種形式或另一種形式的較多或較少的存在可以取決于植物生長條件并因此取決于環(huán)境參數(shù)，和取決于用于后續(xù)加工和儲存階段的條件兩者。在工業(yè)大麻(industrialhemp)的處理工藝中，生物質(zhì)實際上可以經(jīng)歷干燥階段，該干燥階段由于加熱可以導(dǎo)致大麻素(CBDA)的酸形式以其脫羧形式(CBD)脫羧。如果生物質(zhì)在其使用之前儲存持續(xù)較長時間，則脫羧過程可以甚至在低溫(R.T.)發(fā)生。

現(xiàn)有技術(shù)狀態(tài)中已知的中性大麻素，特別是CBD的分離工藝(參見例如US2015/0038567中所描述的分離工藝)被證明是相當(dāng)麻煩的，并且用可以容易地在工業(yè)規(guī)模上使用的工藝獲得具有高純度的中性大麻素不總是可能的。

本發(fā)明的目的是提供用于從工業(yè)大麻類生產(chǎn)呈高純度結(jié)晶形式的CBD或其他中性大麻素的工藝。

 

發(fā)明概述

本發(fā)明通過用于生產(chǎn)CBD或其他中性大麻素的工藝解決了上文提及的問題，所述工藝包括：

i)在從0℃至溶劑的回流溫度的溫度使含有CBD和/或CBDA或所述其他中性大麻素的生物質(zhì)或者呈羧酸的形式的生物質(zhì)與提取溶劑接觸持續(xù)至少10分鐘，以在生物質(zhì)去除之后獲得提取溶液；所述提取溶劑選自由以下組成的組：戊烷、己烷、庚烷、辛烷、甲基環(huán)己烷、丙酮、丙醇、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、甲苯、二氯甲烷及其混合物；

根據(jù)工藝(A)繼續(xù)，所述工藝(A)包括：

ii-a)使提取溶液與水-醇溶液接觸，并且用合適的堿性溶液將pH調(diào)節(jié)至7.5-12.5，以在相分離之后，獲得第一水-醇相和第一有機相；在提取溶劑是水混溶的溶劑的情況下，還添加選自由以下組成的組的第一水不混溶的溶劑：戊烷、己烷、庚烷、甲基環(huán)己烷及其混合物；

iii-a)使第一水-醇相與第二水不混溶的溶劑和適合于使pH達(dá)到2.0-6.5的酸溶液接觸，以獲得第二有機相和第二水-醇相；所述第二水不混溶的溶劑選自由以下組成的組：戊烷、己烷、庚烷、甲基環(huán)己烷及其混合物；

iv-a)將第二有機相濃縮，并且使所得到的油在65℃和180℃之間的溫度經(jīng)歷加熱持續(xù)至少10分鐘的時間，以獲得CBDA到CBD的脫羧；

或者根據(jù)工藝(B)繼續(xù)，所述工藝(B)包括:

ii-b)將提取溶液濃縮直到獲得提取油，并且在小于20℃的溫度使提取油與醇接觸持續(xù)至少10分鐘，以獲得提取物和蠟的懸浮液，所述醇選自由以下組成的組：甲醇、乙醇、丙醇及其混合物；

iii-b)將懸浮液過濾并濃縮以獲得無蠟提取油，并且使無蠟提取油與水不混溶的有機溶劑和水-醇溶液接觸以獲得含有無蠟且無瀝青的提取物(wax-andpitch-freeextract)的有機相和含有瀝青的水-醇相；

iv-b)將含有無蠟且無瀝青的提取物的有機相濃縮，并且使用合適的洗脫劑相經(jīng)歷硅膠色譜法，并且收集含有CBD或所述其他中性大麻素的級分；

并且用以下結(jié)束

v)使CBD或所述其他中性大麻素從選自由戊烷、己烷、庚烷、辛烷、甲基環(huán)己烷及其混合物組成的組的第三水不混溶的溶劑中結(jié)晶。

令人驚訝地，已經(jīng)看到本發(fā)明中描述的(-)-大麻二酚(CBD)提取和分離方法可以通過本文中定義為工藝A和工藝B的兩種工藝中的任一種被應(yīng)用于具有酸性形式(CBDA)和脫羧形式(CBD)的任何比的“生物質(zhì)”。

應(yīng)當(dāng)注意的是，由于其特定的簡單性，工藝A被指示用于服從更嚴(yán)格的規(guī)則的制藥領(lǐng)域中的加工。

除了回收CBD之外，工藝B還適用于獲得其他大麻素(例如CBG、CBN等)。

發(fā)明的詳細(xì)說明

根據(jù)本發(fā)明，戊烷、己烷、庚烷和辛烷溶劑意圖作為正戊烷、正己烷、正庚烷、正辛烷或其異構(gòu)體混合物。

優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明，所使用的原料(即生物質(zhì))是工業(yè)大麻(大麻物種；苜蓿亞種)。作為替代方案并且同樣優(yōu)選地，可以使用工業(yè)大麻類，例如：Antal、Armanca、Beniko、Bialobrzeskie、Cannakomp、Carma、Carmagnola、Carmaleonte、Chamaeleon、Codimoro、CS、DaciaSacuieni、Delta-Ilosa、Delta-405、Denise、Diana、Dioica88、ElettaCampana、Epsilon68、Fedora17、Felina32、Férimon、Fibranova、Fibrol、Finola、Futura75、Ivory、KCBonusz、KCDora、KCVirtus、KCZuzuna、Kompolti、KompoltiHibridTC、Lipko、Lovrin110、Marcello、Markant、Monica、Rajan、Ratza、Santhica23、Santhica27、Santhica70、SecuieniJubileu、Silvana、Szarvasi、Tiborszallasi、Tisza、Tygra、UnikoB、Uso-31、Wielkopolkie、Wojko、Zenit。

生物質(zhì)優(yōu)選地在根據(jù)本發(fā)明的工藝經(jīng)歷溶劑提取之前被微粉化。

工藝A：

優(yōu)選地，CBDA和CBD提取通過保持大麻與溶劑接觸而發(fā)生，所述溶劑合適地選自由

戊烷、己烷、庚烷、辛烷、甲基環(huán)己烷及其混合物組成的組；更優(yōu)選地使用己烷(正己烷或異構(gòu)體混合物)作為提取溶劑。

根據(jù)工藝A的提取優(yōu)選地在0℃和35℃之間、更優(yōu)選地在10℃和25℃之間的溫度發(fā)生，持續(xù)至少10分鐘的時間。

根據(jù)本發(fā)明的工藝A，酸形式(CBDA)通過添加水-醇溶液與脫羧形式(CBD)和與雜質(zhì)分離，其中所述醇合適地選自由乙醇、甲醇組成的組，優(yōu)選地是甲醇。分離通過在攪拌下添加合適的堿性溶液、優(yōu)選地使用30％NaOH溶液，使pH在7.5和12.5之間、更優(yōu)選地在8.0和8.5之間、甚至更優(yōu)選地在8.2和8.3之間來發(fā)生。已經(jīng)觀察到，pH8.2-8.3是特別有利的，以便不允許在水醇相中提取，還有時存在脂肪酸諸如ω-3或ω-6，甚至在起始生物質(zhì)中以大量存在。

回收第一水-醇相，并且通過在攪拌下添加第二或多或少非極性水不混溶的溶劑、優(yōu)選地使用己烷(正己烷或異構(gòu)體混合物)并且添加酸溶液、優(yōu)選地使用乙酸溶液，使pH在6.5和2.0之間、優(yōu)選地在4.5和5.5之間、甚至更優(yōu)選地在4.8和5.2之間來提取CBDA。

第二有機相被濃縮成油，并且在其中所含有的CBDA在將油在65℃和180℃之間的溫度保持持續(xù)至少10分鐘的時間的情況下被脫羧成CBD。

然后使CBD結(jié)晶。

B工藝

CBDA和CBD提取通過在溶劑的回流溫度保持大麻與溶劑接觸持續(xù)至少10分鐘的時間來發(fā)生，所述溶劑優(yōu)選地選自由丙酮、丙醇、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、甲苯、正己烷或己烷-異構(gòu)體混合物組成的組；更優(yōu)選地是甲醇。如果需要，將懸浮液保持在攪拌下直到CBDA完全脫羧成CBD。

懸浮液可以在回流下保持持續(xù)甚至60小時或更長時間。

生物質(zhì)通過過濾或離心分離，并且將含有CBD的溶液濃縮直至油。

存在于提取溶液中的蠟通過添加醇、優(yōu)選地使用甲醇，將溫度保持在低于20℃、優(yōu)選地4℃-10℃、甚至更優(yōu)選地4℃持續(xù)至少10分鐘的時間來消除。將懸浮液過濾，并且將無蠟溶液濃縮成油。

通過在攪拌下添加適當(dāng)選擇的溶劑和水-醇溶液從油中除去瀝青，所述溶劑選自由甲苯、戊烷、己烷、庚烷、辛烷及其混合物組成的組、優(yōu)選地使用己烷(正己烷或異構(gòu)體混合物)，其中所述醇適當(dāng)?shù)剡x自由乙醇和甲醇組成的組，優(yōu)選地使用甲醇。

己烷相被濃縮成油并且被裝載到硅膠柱上，所述硅膠柱使用優(yōu)選地己烷(正己烷或異構(gòu)體混合物)和乙酸乙酯的混合物作為洗脫相，優(yōu)選地以在20：1和5：1之間、甚至更優(yōu)選地10：1的比。

將含有純化的CBD的級分匯集在一起并濃縮在油中，并且在其中含有的CBD被結(jié)晶。

結(jié)晶

CBD的結(jié)晶，無論CBD是來自工藝A還是來自工藝B，通過在攪拌下添加與油重量相比的0.3-3體積、優(yōu)選地0.5-1、甚至更優(yōu)選地0.6體積的溶劑來實現(xiàn)。溶劑合適地選自由戊烷、己烷、庚烷、辛烷和甲基環(huán)己烷組成的組，優(yōu)選地使用在小于30℃的溫度持續(xù)至少10分鐘的時間的己烷或庚烷(或它們的異構(gòu)體的混合物)或甲基環(huán)己烷作為結(jié)晶溶劑。結(jié)晶任選地通過添加最小量的晶體CBD來觸發(fā)。

任選地，該結(jié)晶步驟可以通過在攪拌下添加相對于油重量的0.3-3體積、優(yōu)選地0.5-2.5、還更優(yōu)選地2體積的溶劑來重復(fù)第二次以獲得具有甚至更高純度的產(chǎn)物。

本發(fā)明的有利方面是工藝A和工藝B可以被整合，因為從ii-b到iv-b的工藝步驟可以被應(yīng)用于從工藝A的步驟ii-a獲得的第一有機相，以回收在其中所含有的CBD或其他中性大麻素。

根據(jù)以下實施方案可以更好地理解本發(fā)明。

 

附圖簡述

圖1-示出了具有不同的在CBDA和CBD之間的比和相關(guān)的RT的兩種大麻提取物的

HPLC跡線(HPLCtrace)。

實驗部分

材料和方法

HPLC

柱＝ThermoAccucoreC18(100x4.6mm；2.6μm)。

溫度＝50℃。

洗脫相＝呈梯度-水(H3PO40.05％)/乙腈。

檢測器＝UV(200-210nm)。

RT(CBDA)＝約4分鐘

RT(CBD)＝約5分鐘

實施例1

從生物質(zhì)中的己烷提取(測試Q207D/394)：

將132Kg的己烷和40kg的微粉化的大麻引入到配備有攪拌軸的250升鋼制帶夾套的反應(yīng)器中，同時在20℃的溫度攪拌持續(xù)4小時。

在此時間之后，懸浮液已經(jīng)從反應(yīng)器中排出，并且在真空下以2個等分試樣過濾。在每個等分試樣中通過過濾器保留的生物質(zhì)已經(jīng)用10升的己烷洗滌。

過濾的溶液已經(jīng)被重新裝載到反應(yīng)器中，并且在<35℃的溫度在真空下以最小可能的體積濃縮。已經(jīng)獲得7.48kg的含有508.64g的CBDA+125.7g的CBD的濃縮的溶液(通過HPLC分析獲得的值)。

濃縮的溶液已經(jīng)保持在<30℃的溫度用于后續(xù)階段。

CBDA與CBD的分離(測試Q207D/396)：

已經(jīng)在配備有攪拌軸的3升四頸玻璃燒瓶中引入1001.0g(含有77.7g的CBDA+16.8g的CBD)的濃縮的溶液、540ml的甲醇、810ml的軟化水和5g亞硫酸氫鈉。pH已經(jīng)通過添加30％NaOH溶液(約125ml)在攪拌下被校正至12.0。整體已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用于將上部己烷相(1)與下部甲醇-水相(1)分離。

分液漏斗已經(jīng)被卸載，保持兩相分離并且將上部己烷相(1)轉(zhuǎn)移回四頸燒瓶中，在該四頸燒瓶中在攪拌的同時已經(jīng)引入160ml的甲醇、240ml的軟化水和5g亞硫酸氫鈉。pH已經(jīng)通過添加30％NaOH溶液被調(diào)節(jié)至12.5。

整體已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用于將上部己烷相(2)與下部甲醇-水相(2)分離。

兩個甲醇-水相(1)和(2)已經(jīng)被匯集到四頸燒瓶中，并且400ml的己烷已經(jīng)被添加至其。pH已經(jīng)通過添加冰乙酸在攪拌下被降低至5.5，并且整體已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，以允許將上部己烷相(3)與下部甲醇-水相(3)分離。

己烷相(2)已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到4頸燒瓶中，并且相等體積的軟化水已經(jīng)被添加至其。pH已經(jīng)通過添加冰乙酸在攪拌下被降低至5.5，并且整體已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用于將上部己烷相(4)與下部水相(4)分離。

結(jié)果(HPLC分析)：

包含在己烷相(3)中的CBDA的脫羧：

己烷相(3)已經(jīng)被放置在配備有攪拌軸和冷凝器的500ml4頸燒瓶中，用于回收蒸餾的己烷，并且在攪拌下在120℃的溫度加熱的甘油浴中經(jīng)歷脫羧持續(xù)約7小時。濃縮成油的溶液已經(jīng)被冷卻至室溫，用150ml的己烷稀釋，并且在真空下在化石粉板(paneloffossilflour)上過濾。

然后，過濾的溶液已經(jīng)借助于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在45℃的溫度再濃縮，獲得77.7g的油(含有65.9g的CBD)。

CBD的結(jié)晶：

77.7g的油已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到配備有攪拌軸的250ml4頸玻璃燒瓶中，并且77ml的己烷已經(jīng)被添加至其。整體已經(jīng)在4℃的冷室中攪拌持續(xù)3小時。在此時間之后，結(jié)晶固體在Gouch(G3)上過濾(總是在4℃的冷室中)并且用兩個各自25ml等分試樣的冷己烷洗滌。已經(jīng)獲得46.5g的具有98.9％的HPLC純度的晶體。

從結(jié)晶的母液中回收CBD：

從先前的結(jié)晶步驟獲得的母液已經(jīng)借助于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在45℃的溫度濃縮，獲得31g的油，該油已經(jīng)在4℃的冷室中被轉(zhuǎn)移到100ml4頸燒瓶(配備有攪拌軸)中。15ml的己烷已經(jīng)被添加至油。整體已經(jīng)在攪拌下保持持續(xù)6小時。在此時間之后，結(jié)晶固體已經(jīng)在Gouch(G3)上過濾(總是在4℃的冷室中)，并且用三個等分試樣的各自5ml的冷己烷洗滌。已經(jīng)獲得6.0g的具有97.9％HPLC純度的晶體。

實施例2

蠟消除：

根據(jù)方法(A)獲得的含有1.98g的CBD和0.48g的CBDA的87.7g的第一己烷相已經(jīng)借助于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在50℃的溫度在真空下被濃縮成油。50ml的甲醇已經(jīng)被添加至油，并且整體已經(jīng)被轉(zhuǎn)到-20℃持續(xù)一夜。

懸浮液已經(jīng)在Gouch(G3)過濾漏斗上在真空下過濾，并且通過過濾器保留的蠟已經(jīng)用兩個50ml等分試樣的冷甲醇洗滌。過濾的產(chǎn)物已經(jīng)借助于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在50℃的溫度在真空下濃縮，獲得8.1g的含有1.60g的CBD和0.31g的CBDA的油。

硅膠色譜法：

100g的硅膠已經(jīng)被裝填在玻璃柱(5cmxh20cm)中，并且用250ml的流動相(己烷-乙酸乙酯10：1)在等流(equicurrent)下平衡。

8.1g的來自先前步驟的油在用約8ml的流動相稀釋它們之后已經(jīng)被裝載在柱上。洗脫通過落下而發(fā)生，并且已經(jīng)收集12個各自22g的級分。對包括的從編號4到編號12的級分已經(jīng)進(jìn)行HPLC分析，以驗證CBD含量和相對純度。

 

已經(jīng)獲得包括的從編號4到編號9(高純度級分)、具有1.41g的總CBD含量的級分池，以及包括的從編號10到編號12(平均純度的級分)、具有0.138g的總CBD含量的級分池。

實施例3

從生物質(zhì)中的己烷提?。?/span>

將2kg的微粉化的大麻和10升的己烷(異構(gòu)體混合物)引入到配備有攪拌軸的15升玻璃燒瓶中。整體已經(jīng)在攪拌下被保持在室溫持續(xù)4小時。在此時間之后，懸浮液已經(jīng)通過用6升的己烷洗滌過濾器上的生物質(zhì)在真空下通過布氏漏斗在濾紙上過濾。過濾的產(chǎn)物已經(jīng)借助于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在30℃的溫度在真空下濃縮直至860ml的體積。

CBDA與CBD的分離：

含有21.23g的CBDA和1.8g的CBD(從HPLC分析獲得的值)的過濾的溶液已經(jīng)被引入到配備有攪拌軸的3升4頸玻璃燒瓶中，并且已經(jīng)向其添加478ml的甲醇和360ml的軟化水。pH已經(jīng)通過在劇烈攪拌的情況下添加約7ml的30％NaOH溶液被增加至8.2。

整體已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用于將上部己烷相(1)與下部甲醇-水相(1)分離。

甲醇-水相(1)已經(jīng)被轉(zhuǎn)移回4頸燒瓶中，并且已經(jīng)在攪拌下添加740ml的己烷(異構(gòu)體混合物)。pH已經(jīng)通過添加約20ml的冰乙酸被調(diào)節(jié)至5.0。

整體已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用于將上部己烷相(2)與下部甲醇-水相(2)分離。

包含在己烷相(2)中的CBDA的脫羧：

己烷相(2)已經(jīng)被放置在配備有攪拌軸和冷凝器的1升4頸燒瓶中，用于回收蒸餾的己烷，并且在攪拌下在120℃的溫度加熱的甘油浴中經(jīng)歷脫羧持續(xù)約4小時。

CBD的結(jié)晶：

含有CBD的溶液已經(jīng)通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在50℃的溫度在真空下濃縮，獲得24.3g的油，該油已經(jīng)用14.5ml的己烷(異構(gòu)體混合物)稀釋并且放置在4℃的冷室中過夜。在此時間之后，懸浮液已經(jīng)在Gouch(G3)上過濾，并且晶體已經(jīng)用6ml的冷己烷洗滌。已經(jīng)獲得10.1g的具有99.6％的純度的濕晶體CBD和42.2g的含有3.88g的CBD的母液。

實施例4

從生物質(zhì)中的己烷提?。?/span>

將150kg的微粉化的大麻和700升的己烷(異構(gòu)體混合物)引入到配備有攪拌系統(tǒng)的鋼制干燥過濾器中。整體在攪拌下被保持在室溫持續(xù)1小時。在此時間之后，已經(jīng)停止攪拌并且懸浮液已經(jīng)通過氮氣壓力過濾。含有CBDA的過濾的產(chǎn)物已經(jīng)被收集在水箱中。通過過濾器保留的生物質(zhì)已經(jīng)用兩個各自450升等分試樣的己烷洗滌，同時將整體在攪拌下保持在室溫持續(xù)一小時，并且通過氮氣壓力將濾液每次排出到收集水箱中。

耗盡的生物質(zhì)已經(jīng)從干燥過濾器中排出，在該干燥過濾器中已經(jīng)裝載另外的150kg的新鮮微粉化的大麻用于第二次提取。

預(yù)濃縮：

從兩次各自150Kg的大麻的提取中獲得的過濾的溶液已經(jīng)被匯集在配備有攪拌系統(tǒng)和冷凝器的帶夾套的鋼制反應(yīng)器中，并且在30℃的溫度在真空下濃縮直至約180升的體積。

CBDA與CBD的分離：

180升的預(yù)濃縮的溶液已經(jīng)被裝載到配備有攪拌軸和冷凝器的250升鋼制帶夾套的反應(yīng)器中，并且在16℃和20℃之間的溫度在真空下以約130升的最終體積濃縮。54升的飲用水已經(jīng)被裝載到具有57升的甲醇的反應(yīng)器中。在攪拌下通過添加30％氫氧化鈉溶液，使pH達(dá)到8.2。全部已經(jīng)保持靜態(tài)靜止持續(xù)60分鐘。兩相已經(jīng)被分別排出，并且水-醇相已經(jīng)被重新裝入反應(yīng)器中，并向其添加76.6Kg的己烷(異構(gòu)體混合物)。pH已經(jīng)通過添加3.75升的冰乙酸在攪拌下達(dá)到5.0，并且整體已經(jīng)保持靜態(tài)靜止持續(xù)一小時。

下部水醇相(115Kg)已經(jīng)被排出到罐中用于處置，而上部己烷相已經(jīng)在約50℃的溫度在真空下濃縮，獲得約27Kg的最終重量，并且被回收用于后續(xù)脫羧階段。

包含在己烷相(2)中的CBDA的脫羧：

包含14.48Kg的CBDA(來自HPLC分析)的來自先前步驟的4個己烷相已經(jīng)被匯集在配備有攪拌軸的250升鋼制帶夾套的反應(yīng)器中，并且在50℃的溫度濃縮至油。溫度已經(jīng)在攪拌下達(dá)到約120℃持續(xù)4小時。在此時間之后，13.6Kg的己烷(異構(gòu)體混合物)已經(jīng)被添加到反應(yīng)器中，并且30.3Kg的溶液已經(jīng)被排出用于后續(xù)結(jié)晶步驟。

CBD的第1次結(jié)晶：

30.3Kg的來自先前步驟的CBD溶液已經(jīng)在真空下通過布氏過濾漏斗在紙上過濾，并且裝載到配備有攪拌軸的25升玻璃反應(yīng)器中。溶液已經(jīng)在50℃的溫度在真空下濃縮成油，并且在將其冷卻至35℃之后，已經(jīng)添加6Kg的己烷(正己烷)。溶液已經(jīng)被冷卻至20℃，并且結(jié)晶已經(jīng)通過添加20g的晶體CBD來觸發(fā)。

在30分鐘之后，溫度已經(jīng)達(dá)到4℃，保持在攪拌下持續(xù)12小時。

懸浮液已經(jīng)在真空下通過布氏過濾漏斗在紙上過濾，并且晶體已經(jīng)用6升的冷己烷(正己烷)洗滌。已經(jīng)獲得8.16Kg的具有0.33％的LOD和98.6％的純度的濕晶體CBD以及12.65Kg的含有2.96Kg的CBD的母液。

CBD的第2次結(jié)晶:

8.16Kg的來自先前步驟的晶體CBD已經(jīng)被裝載到配備有攪拌軸的25升玻璃反應(yīng)器中，并且在35℃在攪拌下加入8.48Kg的己烷(正己烷)直到完全溶解。通過進(jìn)行下降斜坡(descendingramp)使溫度達(dá)到4℃，并且保持持續(xù)12小時。

懸浮液已經(jīng)在真空下通過布氏過濾漏斗在紙上過濾，并且晶體已經(jīng)用6.7升的冷己烷(正己烷)洗滌。已經(jīng)獲得6.94Kg的具有99.4％的純度的濕晶體和11.9Kg的含有625g的CBD的母液。

實施例5

從生物質(zhì)中甲醇提取CBD(參見FDL#2728PF_01_01)：

在帶夾套的且配備有攪拌軸的6000升鋼制反應(yīng)器中，已經(jīng)引入3500kg的甲醇，并且在攪拌下引入1000kg的微粉化的生物質(zhì)。溫度已經(jīng)在回流下達(dá)到63℃-67℃。整體已經(jīng)保持在攪拌下直到CBDA相對于CBD的百分比≤7％(約60小時)。在將反應(yīng)器的內(nèi)部溫度降低至15℃-25℃之后，懸浮液已經(jīng)通過在帆布上以450-500rpm離心持續(xù)20-25分鐘來過濾，用約20kg的甲醇洗滌生物質(zhì)3次，持續(xù)25-30分鐘。為了消除蠟組分，過濾的溶液已經(jīng)被重新裝入反應(yīng)器中，并且在50℃的溫度在真空下濃縮，直到獲得可攪拌的(agitable)油狀殘余物，向該油狀殘余物已經(jīng)添加300升的甲醇。反應(yīng)器溫度已經(jīng)通過在真空下在回流下蒸餾持續(xù)30分鐘而達(dá)到63℃-67℃。在此時間之后，溫度已經(jīng)被降低至-5--10℃，并且懸浮液已經(jīng)保持在緩慢攪拌下持續(xù)約12小時，在其結(jié)束時溫度已經(jīng)增加至5-10℃。在攪拌下已經(jīng)添加22Kg的化石粉，并且懸浮液已經(jīng)通過在帆布上以450-500rpm離心持續(xù)60分鐘來過濾，進(jìn)行3次洗滌，每次用約40kg的冷甲醇(5℃-10℃)持續(xù)35-40分鐘。

瀝青的消除(參見FDL#2728PF_02_01)：

過濾的溶液已經(jīng)被裝回反應(yīng)器中，并且在50℃的溫度在真空下濃縮，直到獲得可攪拌的油狀殘余物，向該油狀殘余物已經(jīng)添加400升的甲醇。反應(yīng)器溫度已經(jīng)通過在真空下在回流下蒸餾持續(xù)30分鐘達(dá)到63℃-67℃。在此時間之后，溫度已經(jīng)降低至15℃-25℃，并且150Kg的己烷和150升的軟化水已經(jīng)被裝載到反應(yīng)器中?；旌衔镆呀?jīng)在攪拌下被保持在15℃-25℃的溫度持續(xù)30分鐘，并且靜置持續(xù)另外的30分鐘，以允許下部甲醇-水相(1)與上部己烷相(1)分離。甲醇-水相(1)已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到其中還已經(jīng)引入75kg的己烷的第二反應(yīng)器中?；旌衔镆呀?jīng)在攪拌下被保持在15℃-25℃的溫度持續(xù)30分鐘，并且靜置持續(xù)另外的30分鐘，以允許下部甲醇-水相(2)與上部己烷相(2)分離。甲醇-水相(2)已經(jīng)從其中已經(jīng)引入己烷相(1)的反應(yīng)器中排出。由此匯集的兩個己烷相已經(jīng)在50℃的溫度在真空下濃縮，獲得43kg的濃縮的溶液。已經(jīng)采集濃縮的產(chǎn)物的樣品用于確定CBD含量。

結(jié)果：

干重＝43.9Kg

CBD的總含量＝16.0Kg

CBD/干重比率x100＝36.4％

硅膠色譜法(參見FLD#2728PF_03A_01)：

鋼柱(80cmxh200cm)已經(jīng)填充有400kg的硅膠，并且以250-300升/小時的流量

用1000升的流動相(己烷-乙酸乙酯10：1)在等流下平衡。

43.9Kg的無瀝青的提取物已經(jīng)用己烷(異構(gòu)體混合物)稀釋直至54kg的總重量，并且被裝載到柱中。洗脫以250-300升/小時的流量用流動相(己烷-乙酸乙酯10：1)在等流下發(fā)生。已經(jīng)收集11個各自100Kg的級分，對其已經(jīng)進(jìn)行HPLC分析以驗證CBD含量和相對純度。

結(jié)果

 

具有在從86.6％至91.7％的范圍內(nèi)的HPLC純度的級分(高純度級分池)已經(jīng)被匯集用于后續(xù)結(jié)晶步驟。具有從81.1％至84.7％的純度的級分已經(jīng)被匯集(中等純度的級分池)，并且在已經(jīng)與來自其他色譜法的中等純度的其他級分合并之后在柱上再次純化。

CBD的第1次結(jié)晶(參見FDL#2728PF_01_02)：

69.5Kg的來自硅膠上的兩次不同的純化且含有25.27Kg的CBD的高純度級分池已經(jīng)被收集，在帆布上真空過濾，裝載到配備有攪拌軸的250升鋼制帶夾套的反應(yīng)器中，并且在45℃的溫度在真空下濃縮成油。在濃縮結(jié)束時，將溫度在保持?jǐn)嚢璧那闆r下升至70℃持續(xù)3小時。在此時間之后，溫度已經(jīng)被降低至30℃，并且已經(jīng)添加18升的己烷(異構(gòu)體混合物)。溫度已經(jīng)被降低至15℃-21℃，并且結(jié)晶已經(jīng)通過添加20g的CBD晶體來觸發(fā)。溫度已經(jīng)被進(jìn)一步降低至4℃，并且整體已經(jīng)保持在攪拌下持續(xù)12小時。懸浮液已經(jīng)從反應(yīng)器中排出，并且“原始”CBD晶體已經(jīng)通過在帆布上真空過濾、通過用總共12.6升的冷己烷對晶體進(jìn)行三次洗滌來回收。已經(jīng)獲得相當(dāng)于18.4Kg的干燥的產(chǎn)物的20Kg的具有7.9％的LOD的濕晶體CBD(具有99.22％的HPLC純度)以及32Kg的結(jié)晶母液。

從結(jié)晶母液中回收CBD(參見FDL#2728PF_01_02)：

23Kg的結(jié)晶母液已經(jīng)在配備有真空攪拌軸的玻璃帶夾套的25升反應(yīng)器中在50℃的溫度濃縮直至19升的體積。已經(jīng)添加5升的己烷(異構(gòu)體混合物)，并且在使溫度達(dá)到4℃之后，結(jié)晶已經(jīng)通過添加7g的晶體CBD、在攪拌下保持在4℃過夜來觸發(fā)。懸浮液已經(jīng)在紙上在真空下過濾，并且晶體已經(jīng)用2升的冷己烷(異構(gòu)體混合物)洗滌。

已經(jīng)獲得3.2kg的濕晶體(具有95.94％的HPLC純度)。

實施例6：CBD在甲基環(huán)己烷中的結(jié)晶(測試Q207F/576B)。

根據(jù)實施例4通過方法A獲得的25g的CBD晶體已經(jīng)在配備有磁力攪拌棒的500ml玻璃燒瓶中用250ml的己烷(異構(gòu)體混合物)在室溫在攪拌下溶解，并且留下靜置過夜。溶液已經(jīng)在具有0.8μm的孔隙率的玻璃纖維過濾器上在真空下過濾兩次，并且通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在50℃的溫度濃縮成油。

50ml的甲基環(huán)己烷已經(jīng)被添加至油，并且整體已經(jīng)被放置在4℃的溫度在攪拌下持續(xù)一夜。

懸浮液已經(jīng)在Gouch(G3)過濾漏斗上在真空下過濾，并且晶體已經(jīng)用20ml的冷甲基環(huán)己烷洗滌。

已經(jīng)獲得16.9g的具有99.05％的HPLC純度的濕晶體和24g的母液。

實施例7：CBD在庚烷中的結(jié)晶(測試Q207F/584)。

根據(jù)實施例4通過方法A獲得的22.1g的晶體CBD已經(jīng)在配備有磁力攪拌棒的100ml玻璃燒瓶中用45ml的庚烷在38℃的溫度在攪拌下溶解。溶液已經(jīng)達(dá)到4℃，并且結(jié)晶已經(jīng)通過添加晶體CBD鏟尖(spatulatip)同時通過磁力攪拌棒將整體保持?jǐn)嚢璩掷m(xù)一夜來觸發(fā)。懸浮液已經(jīng)在Gouch(G3)過濾漏斗上在真空下過濾，并且晶體已經(jīng)用兩個10ml等分試樣的冷庚烷洗滌。

已經(jīng)獲得20.1g的具有99.2％的HPLC純度的濕晶體和36.4g的母液。

 

圖1

 

摘自國家發(fā)明專利，發(fā)明人：賈瓦尼·斯波納蒂，盧瓦納·瓦尼奧利，馬里納·馬圖利,申請?zhí)?span lang="EN-US"> 201880050039.0,申請日2018.07.26