摘 要: 本發(fā)明公開了一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥及其制備方法，屬于有機肥料技術(shù)領(lǐng)域。該肥料是由復合微生物發(fā)酵菌液100 150份、海藻酸鈉10 15份、食品加工廠廢水100 130份、農(nóng)林廢棄物150 200份、活性劑5 10份、分散劑1 5份制成；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成。該有機肥使用后對黃麻種植過程中常發(fā)生的立枯病具有良好的防效，同時還可以為黃麻生長提供充足的易于吸收的養(yǎng)分，提高黃麻產(chǎn)量和品質(zhì)。
權(quán)利要求書
1.一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，其特征在于，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液100 150份、海藻酸鈉10 15份、食品加工廠廢水100 130份、農(nóng)林廢棄物150 200份、活性劑5 10份、分散劑1 5份；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述副地衣芽孢桿菌，菌株編號為No.CGMCC1.15832，保藏日期2016年9月20日，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；所述膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03，菌株編號為CCTCCNo.M20231473，保藏日期為2023年8月14日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心；所述擬康氏木霉菌菌株編號CCTCCDF20081027，保藏日期1994年10月11日，購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，其特征在于，所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的三種種子液；
（2）將副地衣芽孢桿菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ中，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)5d得到副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液；
（3）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03種子液按照8%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液；
（4）將擬康氏木霉菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到擬康氏木霉菌發(fā)酵液；
（5）將副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液與擬康氏木霉菌發(fā)酵液按照1:1:1的體積比混合即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，其特征在于，所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ組成為：酵母粉5g/L、淀粉水解糖15g/L、玉米漿15g/L、碳酸鈣0.05g/L、硫酸鎂0.05g/L、磷酸二氫鉀2g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，其特征在于，所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ組成為：葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、肌醇磷脂0.5g/L、硫酸銨0.05、硫酸亞鐵0.02g/L、磷酸二氫鉀0.5g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，其特征在于，所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ組成為：淀粉10g/L、蛋白胨5g/L、硝酸鉀0.05g/L、磷酸氫二鉀0.1g/L、硫酸鎂0.05g/L、氯化鈉1g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，其特征在于，所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至80 85℃，磁力攪拌下回流反應1 2h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，其特征在于，所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPaaa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。
8.一種權(quán)利要求1 7中任一項所述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至30 35℃發(fā)酵培養(yǎng)10 12d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為150 200r/min，通風量1.5 2.0vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于有機肥料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥及其制備方法。
背景技術(shù)
黃麻（拉丁學名Corchorus capsularis L），屬椴樹科黃麻屬，韌皮纖維作物，一年生草本植物，喜溫暖濕潤的氣候，短日照作物，別名火麻、綠麻、絡(luò)麻、水絡(luò)麻、野洋麻、圓果黃麻、圓蒴黃麻、苦麻葉、牛泥茨、三珠草、天紫蘇、麻骨頭等，是一種長而柔軟的、有光澤的植物纖維，可以織成高強度的粗糙的細絲。黃麻纖維是最廉價的天然纖維之一，種植量和用途的廣泛都僅次于棉花，具有纖維細軟、強力大、吸濕性能好、散失水分快、可紡性好等特點，可作為紡織原料、工業(yè)原料和生物質(zhì)能源等，用途十分廣闊。除了其莖皮纖維有很大的利用價值外，黃麻葉片也被用作蔬菜和食用，一些可食用黃麻是豐富的蛋白、維生素（A,C,E）和某些激素前體的優(yōu)質(zhì)來源，并且富含鈣和鐵等礦物質(zhì)，它所具有的多種營養(yǎng)價值使其在國內(nèi)得到應用。長果種黃麻葉片不同部位含有一系列生物活性化合物，并表現(xiàn)出多種生物學特性，比如利尿、解熱、鎮(zhèn)痛、滋補、抗菌活性、抗腫瘤、抗糖尿病和大量酚類抗氧化合物，還有降糖、抗肥胖、以及保護胃的功能，在民間常用于治療膀胱炎、排尿困難、發(fā)燒、淋病、咽喉炎、腹瀉和嘔吐，因此被作為糖果、保健和醫(yī)藥用途方面的高價值生物活性回收的重要材料。黃麻葉片富含黃酮類、多酚類等次生代謝產(chǎn)物，可以用于治療各種疾病，具有很高的藥用價值，從長果種黃麻葉片提取得到酚類化合物和類黃酮化合物具有良好的抗氧化能力和抗菌活性，可以作為潛在的化學抗氧化劑及生物防腐劑。
黃麻立枯病(Thanatephorus cucumeris)是黃麻苗期普遍發(fā)生且嚴重的一種病害，病原菌為立枯絲核菌（Rhizoctonia solani），幼苗出土后，被害的麻苗主根及莖基部變褐色，呈濕腐狀，支根幾乎全部腐爛殆盡，病斑處縊縮致幼苗枯萎猝倒而死；在中后期病原菌分泌毒素和細胞壁降解酶，造成黃麻莖基部縊縮腐爛，最終導致猝倒死亡，尤其在連續(xù)陰雨時為害更甚。黃麻立枯病在中國各主要麻區(qū)均有發(fā)生，以華東、華南地區(qū)最為普遍。隨著黃麻栽培面積的擴大，病害有逐年加重的趨勢。黃麻立枯病可導致有效植株數(shù)量減少，進而影響黃麻的產(chǎn)量；同時受害嚴重的黃麻植株纖維品質(zhì)也會下降，進一步影響產(chǎn)量和品質(zhì)，直接給種植黃麻的農(nóng)戶帶來嚴重的經(jīng)濟損失。
目前使用化學藥劑是防治黃立枯病最為有效的方法，但化學藥劑的長期、過量使用造成了防治成本上升、防效下降且存在使用不當容易造成地力下降、土壤養(yǎng)分流失、環(huán)境污染等風險，無法達到理想的增產(chǎn)或病害防治效果。因而亟需一種更高效和環(huán)保的產(chǎn)品用于黃麻促生、產(chǎn)量和品質(zhì)的提高以及立枯病病害的防控。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，該有機肥使用后對黃麻種植過程中常發(fā)生的立枯病具有良好的防效，同時還可以為黃麻生長提供充足的易于吸收的養(yǎng)分，提高黃麻產(chǎn)量和品質(zhì)。
為實現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：
一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液100 150份、海藻酸鈉10 15份、食品加工廠廢水100 130份、農(nóng)林廢棄物150 200份、活性劑5 10份、分散劑1 5份；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述副地衣芽孢桿菌，菌株編號為No.CGMCC1.15832，保藏日期2016年9月20日，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，無需重復保藏；所述膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03(Paenibacillus mucilaginosus MSSW03)，該菌株作為專利程序已于申請日前保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCCNO:M20231473，保藏日期為2023年8月14日；所述擬康氏木霉菌菌株編號CCTCCDF20081027，保藏日期1994年10月11日，購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心，無需重復保藏。
優(yōu)選的，所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的三種種子液；
（2）將副地衣芽孢桿菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ中，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)5d得到副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液；
（3）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03種子液按照8%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液；
（4）將擬康氏木霉菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到擬康氏木霉菌發(fā)酵液；
（5）將副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液與擬康氏木霉菌發(fā)酵液按照1:1:1的體積比混合即得。
優(yōu)選的，所述LB液體種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉5g/L，pH值調(diào)至7.0~7.5，在121℃左右進行滅菌20min。
優(yōu)選的，所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ組成為：酵母粉5g/L、淀粉水解糖15g/L、玉米漿15g/L、碳酸鈣0.05g/L、硫酸鎂0.05g/L、磷酸二氫鉀2g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
優(yōu)選的，所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ組成為：葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、肌醇磷脂0.5g/L、硫酸銨0.05、硫酸亞鐵0.02g/L、磷酸二氫鉀0.5g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
優(yōu)選的，所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ組成為：淀粉10g/L、蛋白胨5g/L、硝酸鉀0.05g/L、磷酸氫二鉀0.1g/L、硫酸鎂0.05g/L、氯化鈉1g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
優(yōu)選的，所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至80 85℃，磁力攪拌下回流反應1 2h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
優(yōu)選的，所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。
本發(fā)明還提供了一種上述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至30 35℃發(fā)酵培養(yǎng)10 12d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為150 200r/min，通風量1.5 2.0vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
本發(fā)明的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥具體用法與用量：可以隨水沖施、滴灌或直接噴施，使用量為5.0kg/畝。
本發(fā)明篩選副地衣芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和擬康氏木霉菌作為活性微生物制備的復合微生物發(fā)酵菌液，其中副地衣芽孢桿菌可分泌多種具有抑菌作用的次級代謝產(chǎn)物，可以抑制病原菌的生長；膠凍樣芽孢桿菌則能夠解磷、釋放土壤中的難溶磷元素，提高養(yǎng)分利用率并增強作物對病害的抵抗力；擬康氏木霉菌在發(fā)酵過程中可以產(chǎn)生多種活性酶、多糖及腐殖酸，其中腐殖酸是一種復雜的有機化合物，具有增加土壤有機質(zhì)含量和土壤保水能力等特點，同時腐殖酸還可以增加植物抗逆性酶的活性，從而增強自身抗病能力。本發(fā)明的復合微生物發(fā)酵菌液針對不同菌株的特點選擇最適宜的發(fā)酵液體培養(yǎng)基分別發(fā)酵培養(yǎng)，獲得活性最高的微生物菌液，然后再等比例混合使用，三種優(yōu)勢菌株協(xié)同作用，在植株根系繁殖形成優(yōu)勢菌群，更有效抑制致病菌的生長繁殖，減少病原菌侵染作物的機會，從而能夠更有效地防治黃麻立枯病。
農(nóng)林廢棄物主要包括秸稈、稻殼、食用菌基質(zhì)、邊角料、薪柴、樹皮、花生殼、枝椏柴、卷皮、刨花等，是大自然一種重要的生物質(zhì)資源和可再生資源。本發(fā)明肥料制備過程中將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水進行厭氧發(fā)酵，經(jīng)過厭氧發(fā)酵處理的農(nóng)業(yè)廢棄物，其有機物結(jié)構(gòu)更為簡單，更易于被后續(xù)的微生物發(fā)酵并轉(zhuǎn)化為腐殖酸，從而提高腐殖酸的產(chǎn)量和質(zhì)量。本發(fā)明將厭氧發(fā)酵與復合微生物有氧發(fā)酵相結(jié)合，所制得液體有機肥料富含更多易于黃麻吸收的養(yǎng)分，增強黃麻抗病能力，提高黃麻的品質(zhì)和產(chǎn)量。
本發(fā)明的活性劑牛蒡葉提取物中含有大量多酚類物質(zhì)，可以促進有益微生物的生長和繁殖，從而增強其活性，且還可以保護微生物免受氧化損傷，從而提高其穩(wěn)定性。本發(fā)明的分散劑兩種組分協(xié)同作用可以增強液體有機肥在葉面的分散性、潤濕性及滲透性，增強肥料的穩(wěn)定性，促進黃麻對養(yǎng)分的吸收和利用，提高黃麻產(chǎn)量和品質(zhì)。
本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明所制備的液體有機肥料對黃麻立枯病防治效果優(yōu)異，減少了農(nóng)藥和化學肥料的使用，降低投入且顯著提高黃麻產(chǎn)量和品質(zhì)，經(jīng)濟效益顯著；同時所使用的農(nóng)林廢棄物及食品加工廠廢水均為再利用資源，提高了資源再利用率，減少環(huán)境污染，保護生態(tài)環(huán)境。
附圖說明
圖1為本發(fā)明不同處理組肥料使用后黃麻葉片中的SOD活性測試結(jié)果；
圖1
圖2為本發(fā)明不同處理組肥料使用后黃麻葉片中的CAT活性測試結(jié)果；
圖2
圖3為本發(fā)明不同處理組肥料使用后黃麻葉片中的POD活性測試結(jié)果。
圖3
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步說明，但不限于此。
實施例1
一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液100kg、海藻酸鈉10kg、食品加工廠廢水100kg、農(nóng)林廢棄物150kg、活性劑5kg、分散劑1kg；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述副地衣芽孢桿菌，菌株編號為No.CGMCC1.15832，保藏日期2016年9月20日，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；所述膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03，菌株編號為CCTCC No.M 20231473，保藏日期為2023年8月14日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心；所述擬康氏木霉菌菌株編號CCTCC DF 20081027，保藏日期1994年10月11日，購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的三種種子液；
（2）將副地衣芽孢桿菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ中，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)5d得到副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液；
（3）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03種子液按照8%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液；
（4）將擬康氏木霉菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到擬康氏木霉菌發(fā)酵液；
（5）將副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液與擬康氏木霉菌發(fā)酵液按照1:1:1的體積比混合即得。
所述LB液體種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉5g/L，pH值調(diào)至7.0~7.5，在121℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ組成為：酵母粉5g/L、淀粉水解糖15g/L、玉米漿15g/L、碳酸鈣0.05g/L、硫酸鎂0.05g/L、磷酸二氫鉀2g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ組成為：葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、肌醇磷脂0.5g/L、硫酸銨0.05、硫酸亞鐵0.02g/L、磷酸二氫鉀0.5g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ組成為：淀粉10g/L、蛋白胨5g/L、硝酸鉀0.05g/L、磷酸氫二鉀0.1g/L、硫酸鎂0.05g/L、氯化鈉1g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至80℃，磁力攪拌下回流反應2h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。
一種上述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至35℃發(fā)酵培養(yǎng)12d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為200r/min，通風量2.0vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
實施例2
一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液150kg、海藻酸鈉15kg、食品加工廠廢水130kg、農(nóng)林廢棄物200kg、活性劑10kg、分散劑5kg；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述副地衣芽孢桿菌，菌株編號為No.CGMCC1.15832，保藏日期2016年9月20日，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；所述膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03，菌株編號為CCTCC No.M 20231473，保藏日期為2023年8月14日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心；所述擬康氏木霉菌菌株編號CCTCC DF 20081027，保藏日期1994年10月11日，購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的三種種子液；
（2）將副地衣芽孢桿菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ中，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)5d得到副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液；
（3）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03種子液按照8%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液；
（4）將擬康氏木霉菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到擬康氏木霉菌發(fā)酵液；
（5）將副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液與擬康氏木霉菌發(fā)酵液按照1:1:1的體積比混合即得。
所述LB液體種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉5g/L，pH值調(diào)至7.0~7.5，在121℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ組成為：酵母粉5g/L、淀粉水解糖15g/L、玉米漿15g/L、碳酸鈣0.05g/L、硫酸鎂0.05g/L、磷酸二氫鉀2g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ組成為：葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、肌醇磷脂0.5g/L、硫酸銨0.05、硫酸亞鐵0.02g/L、磷酸二氫鉀0.5g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ組成為：淀粉10g/L、蛋白胨5g/L、硝酸鉀0.05g/L、磷酸氫二鉀0.1g/L、硫酸鎂0.05g/L、氯化鈉1g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至85℃，磁力攪拌下回流反應1h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。
一種上述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至30℃發(fā)酵培養(yǎng)10d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為150r/min，通風量1.5vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
實施例3
一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液120kg、海藻酸鈉12kg、食品加工廠廢水120kg、農(nóng)林廢棄物180kg、活性劑8kg、分散劑3kg；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述副地衣芽孢桿菌，菌株編號為No.CGMCC1.15832，保藏日期2016年9月20日，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；所述膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03，菌株編號為CCTCC No.M 20231473，保藏日期為2023年8月14日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心；所述擬康氏木霉菌菌株編號CCTCC DF 20081027，保藏日期1994年10月11日，購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的三種種子液；
（2）將副地衣芽孢桿菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ中，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)5d得到副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液；
（3）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03種子液按照8%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液；
（4）將擬康氏木霉菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到擬康氏木霉菌發(fā)酵液；
（5）將副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液與擬康氏木霉菌發(fā)酵液按照1:1:1的體積比混合即得。
所述LB液體種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉5g/L，pH值調(diào)至7.0~7.5，在121℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ組成為：酵母粉5g/L、淀粉水解糖15g/L、玉米漿15g/L、碳酸鈣0.05g/L、硫酸鎂0.05g/L、磷酸二氫鉀2g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ組成為：葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、肌醇磷脂0.5g/L、硫酸銨0.05、硫酸亞鐵0.02g/L、磷酸二氫鉀0.5g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ組成為：淀粉10g/L、蛋白胨5g/L、硝酸鉀0.05g/L、磷酸氫二鉀0.1g/L、硫酸鎂0.05g/L、氯化鈉1g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至85℃，磁力攪拌下回流反應1h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。一種上述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至33℃發(fā)酵培養(yǎng)12d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為180r/min，通風量1.6vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
對比例1
一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液120kg、海藻酸鈉12kg、食品加工廠廢水120kg、農(nóng)林廢棄物180kg、活性劑8kg、分散劑3kg；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03，菌株編號為CCTCC No.M 20231473，保藏日期為2023年8月14日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心；所述擬康氏木霉菌菌株編號CCTCC DF 20081027，保藏日期1994年10月11日，購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03、擬康氏木霉菌分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的兩種種子液；
（2）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03種子液按照8%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液；
（3）將擬康氏木霉菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到擬康氏木霉菌發(fā)酵液；
（4）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液與擬康氏木霉菌發(fā)酵液按照1:1的體積比混合即得。
所述LB液體種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉5g/L，pH值調(diào)至7.0~7.5，在121℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ組成為：葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、肌醇磷脂0.5g/L、硫酸銨0.05、硫酸亞鐵0.02g/L、磷酸二氫鉀0.5g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ組成為：淀粉10g/L、蛋白胨5g/L、硝酸鉀0.05g/L、磷酸氫二鉀0.1g/L、硫酸鎂0.05g/L、氯化鈉1g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至85℃，磁力攪拌下回流反應1h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。
一種上述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至33℃發(fā)酵培養(yǎng)12d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為180r/min，通風量1.6vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
本對比例基本同實施例3，唯一不同的是復合微生物發(fā)酵菌液中不含有副地衣芽孢桿菌及相應發(fā)酵菌液制備。
對比例2
一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液120kg、海藻酸鈉12kg、食品加工廠廢水120kg、農(nóng)林廢棄物180kg、活性劑8kg、分散劑3kg；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、擬康氏木霉菌制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述副地衣芽孢桿菌，菌株編號為No.CG MCC1.15832，保藏日期2016年9月20日，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；所述擬康氏木霉菌菌株編號CCTCC DF 20081027，保藏日期1994年10月11日，購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將副地衣芽孢桿菌、擬康氏木霉菌分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的兩種種子液；
（2）將副地衣芽孢桿菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ中，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)5d得到副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液；
（3）將擬康氏木霉菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到擬康氏木霉菌發(fā)酵液；
（4）將副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液、與擬康氏木霉菌發(fā)酵液按照1:1的體積比混合即得。
所述LB液體種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉5g/L，pH值調(diào)至7.0~7.5，在121℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ組成為：酵母粉5g/L、淀粉水解糖15g/L、玉米漿15g/L、碳酸鈣0.05g/L、硫酸鎂0.05g/L、磷酸二氫鉀2g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅲ組成為：淀粉10g/L、蛋白胨5g/L、硝酸鉀0.05g/L、磷酸氫二鉀0.1g/L、硫酸鎂0.05g/L、氯化鈉1g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至85℃，磁力攪拌下回流反應1h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。
一種上述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至33℃發(fā)酵培養(yǎng)12d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為180r/min，通風量1.6vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
本對比例基本同實施例3，唯一不同的是復合微生物發(fā)酵菌液中不含有膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03及相應發(fā)酵菌液制備。
對比例3
一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥，它是由以下重量份的原料制成：復合微生物發(fā)酵菌液120kg、海藻酸鈉12kg、食品加工廠廢水120kg、農(nóng)林廢棄物180kg、活性劑8kg、分散劑3kg；所述復合微生物發(fā)酵菌液是由副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03制成；所述活性劑為牛蒡葉提取物；所述分散劑為改性有機硅與十二烷基硫酸鈉按照3:1的質(zhì)量比組成；所述副地衣芽孢桿菌，菌株編號為No. CGMCC 1.15832，保藏日期2016年9月20日，購自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；所述膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03，菌株編號為CCTCC No.M 20231473，保藏日期為2023年8月14日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
所述復合微生物發(fā)酵菌液是采用下述方法制備的：
（1）將副地衣芽孢桿菌、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03分別活化后在LB液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得濃度為2×108cfu/mL~3×108cfu/mL的三種種子液；
（2）將副地衣芽孢桿菌種子液按照10%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ中，于30℃發(fā)酵培養(yǎng)5d得到副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液；
（3）將膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03種子液按照8%的接種量接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ中，于28℃發(fā)酵培養(yǎng)3d得到膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液；
（4）將副地衣芽孢桿菌發(fā)酵液、膠凍樣類芽孢桿菌MSSW03發(fā)酵液按照1:1的體積比混合即得。
所述LB液體種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉5g/L，pH值調(diào)至7.0~7.5，在121℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅰ組成為：酵母粉5g/L、淀粉水解糖15g/L、玉米漿15g/L、碳酸鈣0.05g/L、硫酸鎂0.05g/L、磷酸二氫鉀2g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述發(fā)酵液體培養(yǎng)基Ⅱ組成為：葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、肌醇磷脂0.5g/L、硫酸銨0.05、硫酸亞鐵0.02g/L、磷酸二氫鉀0.5g/L，pH值調(diào)至7.0，在115℃左右進行滅菌20min。
所述改性有機硅制備方法如下：將腰果酚縮水甘油醚、N (β 氨乙基) γ 氨丙基甲基二甲氧基硅烷按照1:1的摩爾比混合于氮氣保護下，加熱至85℃，磁力攪拌下回流反應1h，自然冷卻至室溫即得改性有機硅。
所述牛蒡葉提取物是采用下述方法制備的：將牛蒡葉晾干后粉碎至100目，得到牛蒡葉粉；將牛蒡葉粉與50%的乙醇溶液按照1g：30ml的料液比混合后，在400MPa壓力下浸提15min后，離心分離后所得液體即為牛蒡葉提取物。
一種上述的可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥的制備方法，它包括以下步驟：
步驟一：制備復合微生物發(fā)酵菌液；
步驟二：將農(nóng)林廢棄物和食品加工廠廢水混合后厭氧發(fā)酵5d后得到初次發(fā)酵產(chǎn)物；
步驟三：將初次發(fā)酵產(chǎn)物滅菌后與復合微生物發(fā)酵菌液混合，調(diào)節(jié)溫度至33℃發(fā)酵培養(yǎng)12d，發(fā)酵時調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為180r/min，通風量1.6vvm，發(fā)酵完成后過濾，取濾液得到混合發(fā)酵液；
步驟四：分別制備活性劑、分散劑，然后與混合發(fā)酵液、海藻酸鈉混合均勻，分裝即得。
本對比例基本同實施例3，唯一不同的是復合微生物發(fā)酵菌液中不含有擬康氏木霉菌及相應發(fā)酵菌液制備。
對比例4本對比例基本同實施例3，唯一不同的是：復合微生物發(fā)酵菌液三種發(fā)酵液按照1:2:1的體積比混合制得。
對比例5
本對比例基本同實施例3，唯一不同的是：不含有活性劑及活性劑的制備方法。
對比例6
本對比例基本同實施例3，唯一不同的是：不含有分散劑及其制備方法。
對比例7
本對比例基本同實施例3，唯一不同的是：分散劑為改性有機硅。
對比例8
本對比例基本同實施例3，唯一不同的是：分散劑為十二烷基硫酸鈉。
應用例黃麻大田種植試驗
選取湖北省麻城市鐵門崗鄉(xiāng)一處農(nóng)業(yè)種植基地進行種植試驗，供試品種為黃麻179（福建農(nóng)林大學提供），供試土壤為黃棕壤，試驗開始前耕層土壤（0 20cm）的基本信息如下：全氮1.12g/kg，全磷0.46g/kg，全鉀5.5g/kg，堿解氮41.9mg/kg，速效磷11.9mg/kg，速效鉀76.9mg/kg，有機質(zhì)5.51g/kg，容重1.12g/cm3，pH=6.95。試驗共設(shè)11個處理組，分別為實施例3液體有機肥處理組、對比例1 8液體有機肥處理組、市售對照組及空白對照組，每個處理3個重復，共33個小區(qū)，每個小區(qū)面積50m2，種植密度為30萬株/hm2。各小區(qū)在黃麻播種前施用普通市售復合肥料（N P2O5 K2O=15 15 15）10kg/畝，施肥方式均為肥料一次性撒施地表作為底肥，各小區(qū)施肥量保持一致。于齊苗后每個處理組分別施用不同的液體有機肥，使用量按照5kg/畝，液體肥料可以直接噴施也可用清水稀釋后再噴施；其中市售對照組追施等量購自安陽中盛肥業(yè)科技有限公司的復合微生物肥料（有效活菌數(shù)≥0.20億/g，N+P2O5+K2O=8.0%，有機質(zhì)≥20.0%），隨水沖施；空白對照組噴施等量清水。統(tǒng)計每個處理組整個生長周期立枯病病株數(shù)，計算各處理組立枯病發(fā)病率，三個處理組發(fā)病率取平均值。發(fā)病率（%）=發(fā)病植株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100。具體統(tǒng)計結(jié)果見下表1。
表1 黃麻立枯病發(fā)病率統(tǒng)計結(jié)果
從上述表1的結(jié)果可以看出，與空白對照組相比，使用本發(fā)明實施例3制備的液體有機肥后黃麻立枯病發(fā)病率顯著降低，且與市售對照組相比，使用本發(fā)明實施例3制備的液體有機肥后黃麻立枯病發(fā)病率也明顯降低，這說明本發(fā)明所制備的液體有機肥可有效降低黃麻立枯病的發(fā)病率。而對比例1 8中的數(shù)據(jù)則可以看出，改變本發(fā)明中的任意原料組成和配比，相應防治黃麻立枯病的效果減弱或消失。
于黃麻旺長期對上述每個處理組隨機選取新鮮中上部功能葉片10片，沖洗擦凈組織表面雜質(zhì)，剪成條狀后稱取0.5g置于5mL離心管中，加入5mL95%無水乙醇提取液，放置在避光處浸泡直至葉片完全發(fā)白，取上清液用酶標儀測定665nm、649nm和470nm波長下的吸光度值，根據(jù)下述公式測算出每個處理組總?cè)~綠素含量。具體結(jié)果如表2所示。
計算公式如下：
Ca =13.95A665 6.88A649
Cb =24.96A649 7 .32A665
Cx·c =（1000A470 2.05Ca 114.8Cb）/245
CT =Ca +Cb
式中，Ca為葉綠素a含量（mg/g）；Cb為葉綠素b含量（mg/g）；Cx·c為類胡蘿卜素含量（mg/g）；CT為葉綠素總量（mg/g）；A665、A649、A470分別為665nm、649nm、470nm波長下的吸光值。
表2 不同處理組黃麻葉片葉綠素總含量
于黃麻成熟期收獲并統(tǒng)計各處理組黃麻干皮產(chǎn)量（kg/畝）。具體統(tǒng)計結(jié)果見表3。與空白對照組相比，本發(fā)明實施例總?cè)~綠素含量顯著提高，這說明本發(fā)明的液體有機肥施用后對黃麻生長中的光合作用具有促進作用，光合作用的增強可以提高黃麻的葉片光合速率，增加光合產(chǎn)物的積累，為黃麻提供了必要的能量和營養(yǎng)物質(zhì)，還促進了黃麻的生長和發(fā)育，提高了黃麻鮮莖干皮產(chǎn)率。
表3 不同處理組對黃麻產(chǎn)量影響結(jié)果
本發(fā)明還對不同處理組的黃麻旺長期葉片中的防御酶活性進行了測定，具體操作方法為：稱取黃麻葉片0.1g先加入3ml 0.05mol/L的PBS（pH7.8），冰浴研磨勻漿后，再加入2mLPBS沖洗研缽，混勻后，倒入離心管4℃下10000r/min離心20min，上清液即為粗酶液，可用于酶活性測定。分別測定酶粗提液中的SOD、CAT和POD的含量，其中用氮藍四唑光還原法測定SOD；采用紫外吸收法測定CAT，采用愈創(chuàng)木酚法測定POD。具體結(jié)果如圖1 3所示。
抗氧化系統(tǒng)可以清除過量活性氧，提高生理活性，是植物在逆境下自我調(diào)節(jié)，提高抗性的重要系統(tǒng)。從上述圖1 3中可以看出，本發(fā)明實施例制備的液體有機肥使用后，黃麻葉片中的超氧化物歧化酶SOD、過氧化氫酶CAT和過氧化物酶POD酶活性均顯著高于對比例及空白對照例和市售對照例，這說明本發(fā)明的液體有機肥使用后黃麻葉片中的抗氧化系統(tǒng)中防御性酶活性得到提升，提高了黃麻自身的抗逆性，可以更好地應對各種脅迫條件，減少病蟲害的侵染，對于黃麻種植中易發(fā)的立枯病也具有良好的防控效果。
需要說明的是，上述實施例僅僅是實現(xiàn)本發(fā)明的優(yōu)選方式的部分實施例，而非全部實施例。顯然，基于本發(fā)明的上述實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的其他所有實施例，都應當屬于本發(fā)明保護的范圍。
文章摘自國家發(fā)明專利，一種可有效減少黃麻立枯病的液體有機肥及其制備方法，發(fā)明人:邱鴻栓，譚剛艮，黃飛，楊樹威，陳萬陽，申請?zhí)?/font>:202510132081.9，申請日:2025.02.06。
